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蛋白加樣緩沖液主要由TRIS、SDS、溴酚藍(lán)、還原劑等組成。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這使蛋白質(zhì)本身的電荷完全被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異;SDS還可以可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。還原劑可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異,最終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)作為電泳指示劑,可指示電泳結(jié)束的大概時(shí)間。
Leagene 微量蛋白加樣緩沖液(1/6×)即Microprotein loading buffer(1/6×),是一種通過(guò)特別精細(xì)組合配方的經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)成功的蛋白上樣緩沖液。本產(chǎn)品的優(yōu)點(diǎn)有:①4℃保存,兩年內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定;避免-20℃保存產(chǎn)品,使用時(shí)凍融,方便操作。②節(jié)約細(xì)胞蛋白,保證試驗(yàn)樣品充足;提取6孔板中的細(xì)胞蛋白量300μl/孔,按照蛋白樣品裂解液:微量蛋白加樣緩沖液=1:5的比例混合(蛋白樣品占總蛋白上樣體積的1/6),可做180次上樣。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。