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蛋白提取與檢測

產品詳情

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PT0055

福林酚試劑(B,1M)

用途:又叫福林酚試液乙液、Folin-酚試劑B液,酸度為1M,無需稀釋,可直接使用。用于定量測定蛋白質濃度。

儲存條件:室溫,避光,12個月

產品規(guī)格價格(元)
50ml¥48
100ml¥85
500ml¥250

Leagene福林酚試劑(B,1M)英文名稱為Folin & Ciocalteu's Phenol Reagent,即福林酚試劑盒中的試劑B,也就是福林酚II液或福林酚乙液。本產品采用鎢酸鈉、鉬酸鈉、磷酸、鹽酸等按一定比例加熱回流后加入硫酸鋰精制而成。本品為澄清的淡黃(綠)色到深黃(綠)色的即用型試劑,濃度為1N或1mol/L,是2N高濃度福林酚試劑濃度的一半,請根據(jù)實驗需要直接使用或適當稀釋。本品不含苯酚,但可與酚類、非酚類還原物質發(fā)生反應,形成比色法可檢測的發(fā)光原。常用于Lowry法測定蛋白濃度,也用于多肽、多酚、酪氨酸和菠蘿蛋白酶等的定量測定。

蛋白濃度測定有多種方法,如BCA法、Bradford法、Lowry法和雙縮脲法等。Lowry法,又名Folin-Phenol法,操作簡單,為蛋白質測定最經典的高靈敏度方法之一。Lowry法檢測原理與雙縮脲法相同,但前者在后者的基礎上加入了福林酚試劑,極大地增加了顯色量,從而顯著提高了檢測靈敏度。

Lowry法檢測的基本原理如下:蛋白質分子含有與雙縮脲相似的肽鍵,在堿性條件下,與銅離子反應,結合生成蛋白質-銅絡合物。加入福林酚試劑后,試劑中的磷鉬酸鹽-磷鎢酸鹽被蛋白質-銅絡合物所含的酪氨酸和色氨酸等還原,形成深藍色磷鉬藍和磷鎢藍混合物,產生550-750nm之間提高吸光度的色原體,顏色深淺與蛋白質濃度成正比,故可用比色的方法測定蛋白質的含量。在不存在銅離子的情況下,顏色深淺主要取決于蛋白質中酪氨酸和色氨酸的含量,在較小程度上由半胱氨酸和組氨酸決定。銅離子對酪氨酸、色氨酸或組氨酸的顏色形成沒有影響,但會減少半胱氨酸導致的顏色形成。一般情況下,750nm或660nm處的吸光度用于定量較低的蛋白質濃度,而550nm處的吸光度用于定量更高的蛋白質濃度。

成品有腐蝕性,應避免接觸皮膚、粘膜等;試劑顏色變?yōu)槟G色時應棄用。該產品僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。