淀粉酶(AMS)檢測試劑盒(碘-淀粉比色法)其檢測原理是血清或血漿等樣品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解,產生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等,碘液與未被水解的淀粉結合生成藍色復合物,其藍色深淺與未經酶促反應的空白比較,可計算出淀粉酶的活力單位,通過分光光度計檢測660nm處吸光度,可用于檢測細胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液等樣品中內源性的淀粉酶活性。
價格:¥15.00
規(guī)格:反應
貨號:ST1450
品牌:LEAGENE
服務介紹:
淀粉酶(AMS)檢測試劑盒(碘-淀粉比色法)其檢測原理是血清或血漿等樣品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解,產生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等,碘液與未被水解的淀粉結合生成藍色復合物,其藍色深淺與未經酶促反應的空白比較,可計算出淀粉酶的活力單位,通過分光光度計檢測660nm處吸光度,可用于檢測細胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液等樣品中內源性的淀粉酶活性。
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
ST1450 | 淀粉酶(AMS)檢測試劑盒 | 反應 | 15元 |
實驗流程:
1、 準備樣品:
①細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-20℃凍存,用于AMS的檢測。
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水5~10倍稀釋后可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常用生理鹽水10~20倍稀釋后直接用于測定,-20℃凍存,但為了消除樣品本身顏色的干擾,需設置加了樣品但不加底物的對照。
③高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的AMS,可使用生理鹽水或PBS等進行稀釋。
④樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度(mg/ml),以便于后續(xù)計算單位蛋白重量組織或細胞內的AMS含量。
2、 AMS加樣:按照下表設置空白管、測定管,溶液應按照順序依次加入
加入物(ml) | 測定管 | 空白管 |
AMS Assay Buffer | 0.5 | 0.5 |
37℃孵育5min。 | ||
待測樣品 | 0.1 | — |
混勻,置于37℃水浴,準確孵育7.5min。 | ||
KI工作液 | 0.5 | 0.5 |
蒸餾水 | 3.0 | 3.1 |
3、 AMS測定:輕輕混勻,蒸餾水調零,分光光度計(比色杯光徑1cm)測定660nm處吸光度(記為A測定和A空白)。
實驗結果:
全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運輸要求:
1、動植物組織樣本(干冰運輸)
準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。
2、血清樣本(干冰運輸)
全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運輸)
可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
4、細胞樣本
貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!