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超氧陰離子自由基檢測(cè)試劑盒(磺胺比色法)又稱超氧陰離子產(chǎn)生速率檢測(cè)試劑盒，其檢測(cè)原理是在酸性條件下，2份O2-與羥胺反應(yīng)生成1份NO2-，NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和萘胺的作用下反應(yīng)生成粉紅色的偶氮物質(zhì)，以分光光度計(jì)測(cè)定530nm處吸光度，在一定范圍內(nèi)顏色深淺與O2-成正比，根據(jù)A530及NO2-和O2-的相關(guān)反應(yīng)中物質(zhì)的量的關(guān)系，可算出樣品中O2-的濃度，主要用于測(cè)定植物組織中的超氧陰離子自由基含量或超氧陰離子的產(chǎn)生速率及清除能力。
價(jià)格：￥15.00
規(guī)格：反應(yīng)
貨號(hào)：ST1500
品牌：LEAGENE
服務(wù)介紹：
超氧陰離子自由基檢測(cè)試劑盒(磺胺比色法)又稱超氧陰離子產(chǎn)生速率檢測(cè)試劑盒，其檢測(cè)原理是在酸性條件下，2份O2-與羥胺反應(yīng)生成1份NO2-，NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和萘胺的作用下反應(yīng)生成粉紅色的偶氮物質(zhì)，以分光光度計(jì)測(cè)定530nm處吸光度，在一定范圍內(nèi)顏色深淺與O2-成正比，根據(jù)A530及NO2-和O2-的相關(guān)反應(yīng)中物質(zhì)的量的關(guān)系，可算出樣品中O2-的濃度，主要用于測(cè)定植物組織中的超氧陰離子自由基含量或超氧陰離子的產(chǎn)生速率及清除能力。
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
ST1500 | 超氧陰離子自由基檢測(cè)試劑盒 | 反應(yīng) | 15元 |
實(shí)驗(yàn)流程：
1、 準(zhǔn)備樣品：
①植物樣品：取正?；蚰婢诚碌男迈r植物組織，清洗干凈，擦干，切碎，迅速稱取1~1.5g，加入2ml預(yù)冷的O2- Lysis Buffer后冰浴條件下勻漿或研磨，4℃ 10000g離心10min，上清液即為超氧陰離子自由基提取液，4℃保存?zhèn)溆谩?/span>
②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用于該試劑盒的測(cè)定
③高活性樣品：如果樣品中含有較高濃度的超氧陰離子自由基，可以使用O2- Lysis Buffer進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>
2、 配制系列NO2-標(biāo)準(zhǔn)溶液：以NO2-標(biāo)準(zhǔn)(1mM)按下表繼續(xù)稀釋?zhuān)?/span>
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
NO2-標(biāo)準(zhǔn)(1mM) | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 | 0.06 |
蒸餾水 | 0.99 | 0.98 | 0.97 | 0.96 | 0.95 | 0.94 |
NO2-含量(μM) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
3、 O2-加樣：按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入
加入物(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
蒸餾水 | 1 | — | — |
系列NO2-標(biāo)準(zhǔn)(1~6號(hào)) | — | 1 | — |
待測(cè)樣品 | — | — | 0.25 |
O2- Lysis Buffer | — | — | 0.25 |
羥胺溶液 | — | — | 0.5 |
混勻，25℃水浴孵育20min。 | |||
氨基苯磺酸顯色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
萘胺顯色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
混勻，30℃水浴孵育30min。 | |||
4、O2-測(cè)定：以空白調(diào)零，比色杯光徑1cm，分光光度計(jì)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管530nm處吸光度(即為A標(biāo)準(zhǔn)、A測(cè)定)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運(yùn)輸要求：
1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)
準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定。
2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)
全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜（GLU檢測(cè)請(qǐng)勿全血樣本放置過(guò)夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。
3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)
可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。
4、細(xì)胞樣本
貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來(lái)，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。
懸浮細(xì)胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。
細(xì)胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。
僅供科研用途，不可用于臨床診斷！
